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C18 EasyTip –微量蛋白質去鹽吸管尖

簡介：

q  在蛋白質體的研究中，通常研究者分離得到的微量蛋白質樣品中，會殘留一些鹽類或界面活性劑。如未經過適當的前處理步驟，後續進行質譜分析時，便會受到干擾，降低靈敏度及影響其他分析結果。EasyTip便是設計專為微量之胜肽、蛋白質進行快速濃縮和去鹽，以利研究人員進行後續的質譜分析。

產品特點：

q  可清除鹽類和其他緩衝液物質，避免影響質譜分析(如下圖)。

q  操作吸量管時背壓小，拇指動作輕鬆。

q  可在短時間內濃縮、純化pmol (10^-12 mole)級至fmol (10^-15 mole)的胜肽、蛋白質樣品。

q  可濃縮10μL以下之微量胜肽、蛋白質樣品。

q  EasyTip適用大多數品牌之吸量管pipetteman。

MALDI mass spectra of 125 fmol BSA tryptic digest in 2M ABC

C18 EasyTip –微量蛋白質去鹽吸管尖使用方法

溶液配製：

1.先依配方配製下列溶液（使用的溶液須是在一個星期內所配製的）

ACN = acetonitrile (乙腈)；TFA= trifluoroacetic acid (三氟乙酸)

2. 準備下列四個0.2或0.6毫升的離心管，上述溶液分管裝入

操作步驟：

 1.潤    溼：吸取10 mL潤濕液(編號1)2次，拋棄每次吸取的溶液至廢液。

 2.平    衡：吸取10 mL平衡與洗滌液的溶液(編號2)4~5次，拋棄每次吸取

             的溶液至廢液。

 3.導入樣品：緩慢地吸取5 mL的樣品，之後將樣品推出至離心管內；

             重複此步驟至少10次。  

 註：

 ²  若樣品已經冷凍乾燥，請將樣品回溶於5 mL 5% ACN,0.1%

        TFA中(編號4)。以Easy Tip吸取樣品前請將pipet吸取體積

     定於5 mL 並避免吸入空氣。

 ²  確定樣品的pH值必須小於3

 4.洗    滌：吸取10 mL平衡與洗滌液的溶液(編號2)並推出至廢液的離心

              管；重複此步驟5次。

 5.沖堤樣品：吸取離心管3A（或3B）中5 µL的沖堤液並推回，

             重複此步驟3次。若以離心管3B沖堤液沖堤時，可直接將沖堤

             後之樣品直接點至MALDI的sample plate上。 

 註：沖堤時請將pipet吸取體積定於5 mL ，並避免吸入空氣。

 6.樣品結晶：將樣品沖堤液與體積比為1：1介質溶液(matrix)混和，取1 mL

                      的混和液點至MALDI的sample plate上，待sample plate上之

             樣品溶液乾燥形成結晶後即可進行樣品分析。

 註：樣品沖堤時應視樣品濃度不同而調整沖堤液之體積。若樣品量

     低時，為使最後欲結晶之樣品濃度不致於過低，亦可以2 mL沖

     堤液做樣品之沖堤即可。