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蛋白質磷酸化鑑定

 
 

介紹:

 
 

    磷酸化蛋白質調控了細胞間訊息的傳遞、細胞的成長、分化及代謝等重要生理機制。但磷酸化蛋白一般含量低且在生物體內一般呈動態平衡常隨時間及狀態而呈現量的差異,加上被帶負電的磷酸根修飾的胜肽往往訊號被一般胜肽抑制,甚至不易被一般偵測正離子之質譜所偵測而造成分析上的困難。一般需要藉由金屬離子親和層析(immobilized metal ion affinity chromatography),以預濃縮磷酸化胜肽的方式才能有效鑑定磷酸化蛋白,但即使如此,對於更複雜樣品的分析,其分析效能仍有所限制。本分析服務利用二步濃縮的策略(two-step enrichment),先純化磷酸化蛋白後,再進一步濃縮磷酸化胜肽,流程見示意圖Fig-6此方式可順利地從複雜樣品中鑑定出磷酸化蛋白及其磷酸化位點。

 

 

 

Fig-7為從A431細胞萃取物中所鑑定出其中一個磷酸化胜肽MS/MS圖譜。

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