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C18 EasyTip –微量蛋白質去鹽吸管尖 |
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簡介： |
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q 在蛋白質體的研究中，通常研究者分離得到的微量蛋白質樣品中，會殘留一些鹽類或界面活性劑。如未經過適當的前處理步驟，後續進行質譜分析時，便會受到干擾，降低靈敏度及影響其他分析結果。EasyTip便是設計專為微量之胜肽、蛋白質進行快速濃縮和去鹽，以利研究人員進行後續的質譜分析。 |
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產品特點： |
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q 可清除鹽類和其他緩衝液物質，避免影響質譜分析(如下圖)。 q 操作吸量管時背壓小，拇指動作輕鬆。 q 可在短時間內濃縮、純化pmol (10-12 mole)級至fmol (10-15 mole)的胜肽、蛋白質樣品。 q 可濃縮10μL以下之微量胜肽、蛋白質樣品。 q EasyTip適用大多數品牌之吸量管pipetteman。 |
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MALDI mass spectra of 125 fmol BSA tryptic digest in 2M ABC |
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C18 EasyTip –微量蛋白質去鹽吸管尖使用方法 |
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溶液配製： |
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1.先依配方配製下列溶液（使用的溶液須是在一個星期內所配製的） |
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ACN = acetonitrile (乙腈)；TFA= trifluoroacetic acid (三氟乙酸) |
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2. 準備下列四個0.2或0.6毫升的離心管，上述溶液分管裝入 |
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操作步驟： |
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1.潤 溼：吸取10 mL潤濕液(編號1)2次，拋棄每次吸取的溶液至廢液。 2.平 衡：吸取10 mL平衡與洗滌液的溶液(編號2)4~5次，拋棄每次吸取 的溶液至廢液。 3.導入樣品：緩慢地吸取5 mL的樣品，之後將樣品推出至離心管內； 重複此步驟至少10次。 註： ² 若樣品已經冷凍乾燥，請將樣品回溶於5 mL 5% ACN,0.1% TFA中(編號4)。以Easy Tip吸取樣品前請將pipet吸取體積 定於5 mL 並避免吸入空氣。 ² 確定樣品的pH值必須小於3 4.洗 滌：吸取10 mL平衡與洗滌液的溶液(編號2)並推出至廢液的離心 管；重複此步驟5次。 5.沖堤樣品：吸取離心管3A（或3B）中5 µL的沖堤液並推回， 重複此步驟3次。若以離心管3B沖堤液沖堤時，可直接將沖堤 後之樣品直接點至MALDI的sample plate上。 註：沖堤時請將pipet吸取體積定於5 mL ，並避免吸入空氣。 6.樣品結晶：將樣品沖堤液與體積比為1：1介質溶液(matrix)混和，取1 mL 的混和液點至MALDI的sample plate上，待sample plate上之 樣品溶液乾燥形成結晶後即可進行樣品分析。 註：樣品沖堤時應視樣品濃度不同而調整沖堤液之體積。若樣品量 低時，為使最後欲結晶之樣品濃度不致於過低，亦可以2 mL沖 堤液做樣品之沖堤即可。 |
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